河北來(lái)復(fù)醫(yī)藥科技有限公司
聯(lián)系電話：0311-68058422、88662277
地 址：石家莊市高新區(qū)長(zhǎng)江街道天山大街51號(hào)久福大廈8樓818
(1) 樣品處理
1.1 提取用試劑
提取液：含20% 0.1 mol/L氫氧化鉀溶液60%甲醇水溶液；
淋洗液：含30% 0.1mol/L氫氧化鉀溶液，50％乙腈水溶液；
洗脫液：甲醇：乙腈：甲酸：蒸餾水=4：5：0.5：0.5
1. 2 提取
a) 玉米：將樣品粉碎，稱取玉米粉10g，加入50mL氯仿，震蕩3～5分鐘，用濾紙過(guò)濾，取濾液10mL進(jìn)入一個(gè)100mL平底燒瓶中，于60℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，用20mL石油醚溶解殘?jiān)尤?0mL提取液，震蕩3～5分鐘，分層后，用濾紙過(guò)濾，取下層提取液5mL進(jìn)行固相萃取。
b) 糙米、小麥、小麥粉和大豆：將樣品粉碎，稱取粉碎樣品l0g，加入50mL提取液，震蕩3～5分鐘，用濾紙過(guò)濾，取濾液10mL進(jìn)入一個(gè)100mL平底燒瓶中，加入20mL石油醚，震蕩3～5分鐘，分層后，用濾紙過(guò)濾，取下層提取液5mL至Qdaura 卓睿全自動(dòng)固相萃取儀上樣管中進(jìn)行固相萃取操作。
(2) 固相萃取凈化
Cleanert PAX固相萃取柱置于Qdaura卓睿全自動(dòng)固相萃取儀中，上樣管至于對(duì)應(yīng)位置，設(shè)定操作程序如下：5mL甲醇，3mL提取液活化，加樣5mL，10mL淋洗液淋洗，吹干，最后用5mL洗脫液洗脫OA，收集(以上操作流速均為1mL/min)。收集液于60℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用1mL流動(dòng)相溶解殘留物，經(jīng)濾器過(guò)濾后上液相色譜檢測(cè)。
(3) 色譜條件
色譜柱：Venusil ASB C18柱 (4.6 mm×250mm, 5μm)
保護(hù)柱：Venusil ASB C18柱 (4.6mm×10mm, 5μm)
流動(dòng)相：乙腈：水：乙酸=48：51：1；
檢測(cè)器波長(zhǎng)：激發(fā)光333 nm，發(fā)射光460 nm；
進(jìn)樣量：25μL；流速：1mL/min；柱溫：30℃
(4) 結(jié)果
以小麥粉、小麥、玉米、糙米和大豆為研究對(duì)象，分別作三個(gè)不同濃度OA添加水平，這三個(gè)濃度分別為0.8μg/kg、4μg/kg、10μg/kg，每個(gè)濃度水平作6次平行性檢測(cè)。檢測(cè)回收率和精密度數(shù)據(jù)見(jiàn)表l、表2和表3；典型色譜圖見(jiàn)圖3。
表1 添加OA濃度為0.8μg/kg時(shí)各種糧食回收率和精密度:
|
糧食 |
各個(gè)平行試驗(yàn)回收率(%) |
平均回收率(%) |
RSD(%) |
|||||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
|||
|
小麥粉 |
101.8 |
107 |
101.4 |
89.1 |
107.6 |
93.4 |
104.1 |
4.93 |
|
小麥 |
98.2 |
94.6 |
90.2 |
102.5 |
89.9 |
93.4 |
94.8 |
5.13 |
|
玉米 |
1130.3 |
112.2 |
100.5 |
98.5 |
101.9 |
105.7 |
104.8 |
5.13 |
|
糙米 |
86.7 |
89 |
90.9 |
85.7 |
90 |
86.7 |
88.2 |
2.36 |
|
大豆 |
101.2 |
100.9 |
92.9 |
92.2 |
99.4 |
98.4 |
97.5 |
4.07 |
表2 添加OA濃度為4μg/kg時(shí)各種糧食回收率和精密度:
|
糧食 |
各個(gè)平行試驗(yàn)回收率(%) |
平均回收率(%) |
RSD(%) |
|||||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
|||
|
小麥粉 |
96.8 |
92.8 |
83.7 |
85.5 |
89.8 |
92.6 |
90.2 |
5.34 |
|
小麥 |
101 |
99.3 |
98.8 |
106.2 |
100.2 |
98.6 |
100.7 |
2.78 |
|
玉米 |
91.5 |
92.7 |
90.8 |
86.8 |
87.7 |
91.3 |
90.1 |
2.6 |
|
糙米 |
90.3 |
85.7 |
94.1 |
96.3 |
96.1 |
95.8 |
93 |
4.56 |
|
大豆 |
89.5 |
93.8 |
93.7 |
89.4 |
89.1 |
88.9 |
90.7 |
2.61 |
表3 添加OA 濃度為10μg/kg 時(shí)各種糧食回收率和精密度:
|
糧食 |
各個(gè)平行試驗(yàn)回收率(%) |
平均回收率(%) |
RSD(%) |
|||||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
|||
|
小麥粉 |
98 |
95.8 |
92.2 |
78.2 |
95.6 |
89.8 |
91.6 |
7.85 |
|
小麥 |
85.9 |
91.7 |
90.1 |
86 |
90.5 |
88.9 |
88.8 |
2.71 |
|
玉米 |
91.5 |
93.3 |
83.3 |
82.1 |
88.1 |
90.6 |
88.1 |
5.22 |
|
糙米 |
96.2 |
87.9 |
92.6 |
91.1 |
95.4 |
94.7 |
93 |
3.35 |
|
大豆 |
99 |
95.3 |
102.8 |
97.2 |
98.4 |
91 |
97.3 |
4.05 |
表3 小麥中OA 檢測(cè)典型色譜圖:
|
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格包裝 |
訂貨號(hào) |
|
Qdaura卓睿全自動(dòng)固相萃取儀 |
4通道24位 |
SPE-40 |
|
LC-10F高效液相色譜儀 |
10ml/min, 梯度系統(tǒng),200-800nm雙波長(zhǎng)檢測(cè)器 |
FL-LC010GS |
|
CC-100分析型色譜柱溫箱 |
溫控范圍：5-70℃;可安裝1-2支300mm色譜柱 |
CC-100 |
|
Cleanert PAX固相萃取柱 |
200mg/6mL, 30/pk |
AX2006 |
|
Venusil ASB C18液相色譜柱 |
4.6 mm ×250 mm, 5μm |
VS952505-0 |
|
Venusil ASB C18保護(hù)柱 |
4.6mm×10mm, 5μm |
VS950105-0 |
|
針式過(guò)濾器(Nylon) |
0.22μm, 直徑13mm,200/pk |
AS021320 |
|
一次性無(wú)針頭注射器 |
5mL, 100/pk |
ZSQ-5ML |
|
1.5mL樣品瓶 |
短螺紋透明帶書(shū)寫(xiě)32×11.6mm,100/pk |
1109-0519 |
|
1.5mL樣品瓶蓋 |
9mm中心孔藍(lán)蓋，紅色橡膠/米色PTFE隔墊,45．Shore A1.0mm,100/pk |
0915-1819 |
|
甲醇 |
4×4L/箱 |
AH230-4 |
|
乙腈 |
4×4L/箱 |
AH015-4 |
應(yīng)用編號(hào)：CU1010
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